OBJETIVO
- El objetivo de esta práctica es conocer el funcionamiento de un proceso de electroforesis y aprender a pipetear en los distintos pocillos del gel de agarosa.
- Esta práctica es muy útil para evitar fallos o pipetear en el gel de agarosa de manera incorrecta cuando se realice la PCR y electroforesis.
MATERIALES
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Imitación gel de agarosa (sintético) |
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Puntas para micropipeta |
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Cubeta de electroforesis |
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Micropipeta |
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Colorante rojo |
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Agua destilada |
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Molde para gel (sin los topes) |
PROCEDIMIENTO
- Preparamos la cubeta de electroforesis con el gel sintético y el molde para evitar que se mueva.
- Llenamos la cubeta con agua hasta que el agua quede unos milímetros por encima del gel.
- Empezamos a pipetear 10 microlitros de colorante en los pocillos del gel para aprender la técnica.
Nota: Es MUY IMPORTANTE apretar hasta el segundo tope del émbolo de la micropipeta para expulsar el colorante, pero no debemos soltar hasta que no saquemos la punta del agua para evitar absorber líquido de nuevo.
NOTA: El colorante pipeteado en los pocillos se salía de ellos. Esto se debe a que utilizamos colorante sin tampón de carga. Dicho tampón se encarga de dar densidad y peso a la muestra, evitando que se salga al pipetearlo en los pocillos.
- Limpiar y recoger todos los materiales.
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